DESARROLLO DE UNA METODOLOGÍA DE DESINFECCIÓN DE VAINILLA (Vanilla spp.) PARA MICROPROPAGACIÓN IN VITRO

Abstract

El objetivo de esta investigación es desarrollar un protocolo de desinfección de explantes y vainas (semilla) y la evaluación de medios de cultivos sólido y líquido, para la propagación in vitro de Vanilla spp., con el fin de disminuir los problemas de contaminación en laboratorio en plantas provenientes directamente de campo; los medios de cultivo solido se prepararon con Murashige & Skoog (MS), sacarosa, agar, carbón activado, formaldehido suplementado con dos reguladores de crecimiento (AIA) acido indolacético y (GEB) giberelina ) en concentraciones de 0, 2, 12 y 25 mg para cada uno y para los medios de cultivos líquidos se suprimió la adición de agar. Los procesos de desinfección efectuados consistieron en probar diferentes concentraciones y tiempo de exposición al hipoclorito de sodio, tween 20, jabón ecológico (pursue), etanol 70%, Tego 5% y peróxido de hidrogeno 3%. Para este fin se realizaron tres montajes experimentales de la siguiente forma: primero se implementó Hipoclorito en disolución al 30% y jabón ecológico (pursue) 30%; el segundo Hipoclorito en disolución al 40%, jabón ecológico (pursue) 40% y etanol en disolución al 70% y el tercero Tego en disolución al 5%, tween 20 en disolución 5%, etanol 70%, peróxido de hidrogeno 3% e hipoclorito de sodio 5%. Los resultados obtenidos indicaron que el mejor tratamiento de desinfección fue el tercero (Tego en disolución al 5%, tween 20 en disolución 5%, etanol 70%, peróxido de hidrogeno 3% e hipoclorito sodio 5%), mientras que en los dos primeros (1. Hipoclorito en disolución al 30% y jabón ecológico (Pursue) 30%. 2. Hipoclorito en disolución al 40%, jabón ecológico (Pursue) 40% y etanol en disolución al 70%) tratamientos implementados se presentó el 100% de contaminación transcurridos ocho días después de su siembra.

The objective of this research is to develop a protocol for the disinfection of explants and pods (seed) and the evaluation of solid and liquid culture media, for the in vitro propagation of Vanilla spp, in order to reduce contamination problems in the laboratory in plants coming directly from the field; the solid culture media were prepared with Murashige & Skoog (MS), sucrose, agar, activated carbon, formaldehyde supplemented with two growth regulators (AIA) indolacetic acid and (GEB) gibberellin) in concentrations of 0, 2, 12 and 25 mg for each one and for the liquid culture media the addition of agar was suppressed.